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细胞破碎方法

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细胞破碎方法

1、机械破碎法:

机械破碎法:设备简单,可大规模生产,但细胞破碎不完全且对酶活有影响。

研磨法:研钵,球磨机和细菌磨,可大规模生产但效率低,比较费时。

匀浆法:不适于大规模生产,效率不高。

2、物理法:

温度差破碎法:温度突然变化使细胞破碎。

压力破碎法:设备复杂昂贵。和爆玉米花相似。

超声波破碎法:10~25KHZ,产热,需在冰浴状态处理,且处理样品少。

3、化学破碎法:有机溶剂或表面活性剂(Tween-20/Tween-80, triton X-100), 改变膜通透性。然而有机溶剂易燃、易使酶失活,且表面活性剂常需要用凝胶层析除去。

4、酶法:溶菌酶作用于细胞壁的ß-1,4糖苷键。几丁质酶作用于霉菌细胞壁中的几丁质。缺点:价格贵,且不利后续分离纯化。

5、自溶法:在一定pH和温度下,利用自身的酶使细胞裂解。在保温过程中,目的酶会失活,而且会滋生其它微生物。

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